O microbioma vegetal inclui bactérias patogênicas, simbióticas, epífitas e endofíticas. Os endófitos colonizam as plantas internamente, muitas vezes na região intercelular, sem causar nenhum efeito adverso. As bactérias endofíticas estão se tornando cada vez mais reconhecidas na produção agrícola devido à sua potencial utilidade como agentes na promoção do crescimento vegetal, alívio do estresse e fitorremediação.
Banana (Musa sp.) forma uma das principais frutas e culturas alimentares em todo o mundo. Como a banana comercial não contém mais sementes viáveis, a micropropagação é de vital importância. O caule verdadeiro nesta planta herbácea é o cormo subterrâneo, enquanto as bainhas das folhas constituem o pseudocaule. A ponta do caule profundamente arraigada, protegida do exterior por numerosas bases foliares, forma o material de partida para a micropropagação em bananeira, uma prática agora comumente adotada para a rápida multiplicação clonal de tipos elite. Estudos empregando bananas cultivadas em tecidos e cultivadas no campo indicaram associação generalizada de endófitos bacterianos predominantemente em uma forma não cultivável em estoques micropropagados.
Um artigo recente em AoB PLANTS demonstra a aplicação do teste de viabilidade bacteriana viva/morta com imagem confocal em seções de tecido fresco como uma ferramenta simples e eficiente para documentar bactérias endofíticas nativas e também mostrou extensa colonização bacteriana no periespaço entre a parede celular e a membrana plasmática no região crescente da ponta do caule da bananeira. Os microrganismos, presentes em números inumeráveis, compartilham uma associação profunda e integral com o hospedeiro, mas apresentam benefícios aparentemente mutualísticos sem nenhum efeito adverso ou patogênico óbvio sobre o hospedeiro. As observações aqui relatadas abrem caminho para investigações mais aprofundadas sobre a associação e interações planta-endófito.
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Thomas, P., & Reddy, KM (2013) Elucidação microscópica de bactérias endofíticas abundantes colonizando o periespaço da parede celular–membrana plasmática no tecido da ponta do broto da banana. AoB Plants 5: plt011 doi: 10.1093/aobpla/plt011
Este estudo teve como objetivo gerar evidências microscópicas de colonização intratecido em bananeira em apoio aos achados anteriores sobre a associação generalizada de bactérias endofíticas com pontas de brotos de plantas cultivadas no campo e culturas micropropagadas, e para entender a extensão da colonização tecidual. Seções de tecido da bainha da folha (∼50–100 µm) de pontas de brotos coletadas assepticamente de cv. Grand Naine foram tratados com componentes do kit de viabilidade bacteriana Live/Dead SYTO 9 (S9) e iodeto de propídio (PI) seguido por epifluorescência ou microscopia confocal de varredura a laser (CLSM). O S9, que tem como alvo bactérias vivas, mostrou abundantes partículas verdes fluorescentes ao longo da periferia da célula hospedeira em CLSM, aparentemente entre a membrana plasmática e a parede celular. Estes incluíram células bacterianas únicas não móveis e ocasionalmente ativamente móveis vistas em diferentes planos x-y e z-stacks em várias camadas de células, com o sinal de fluorescência semelhante ao de culturas puras de endófitos de banana. O iodeto de propídio, que cora bactérias mortas, não detectou nenhum, mas pós-tratamento com etanol, tanto PI quanto 4',6-diamidino-2-fenilindol detectaram bactérias abundantes. O iodeto de propídio mostrou coloração nuclear clara, assim como o S9 até certo ponto, e os fluoróforos pareciam detectar bactérias na exclusão de organelas vegetais contendo DNA, coletadas em microscopia de campo claro e contraste de fase. A coloração S9-PI não funcionou satisfatoriamente com tecido fixado em formalina ou paraformaldeído. A extensa colonização bacteriana em tecido fresco foi posteriormente confirmada com os rebentos de diferentes cultivares, e foi corroborada por microscopia eletrônica de transmissão. Este estudo, portanto, fornece evidências microscópicas claras da extensa habitação bacteriana endofítica no peri-espaço confinado da parede celular-membrana plasmática no tecido da parte aérea da bananeira com os organismos compartilhando uma associação integral com o hospedeiro. A abundante colonização tecidual sugere um possível envolvimento de endófitos na biologia do hospedeiro, além de reconhecer o peri-espaço da parede celular-membrana plasmática como um nicho importante para bactérias associadas a plantas.
