Elizabete Carmo-Silva mantém-se atualizada sobre métodos inovadores de investigação em ciências vegetais, mas um aspecto do seu trabalho sempre a preocupou – o processo utilizado para produzir os anticorpos de que necessita para a sua investigação.

Tradicionalmente, o processo de produção de anticorpos para investigação envolve a utilização de um pequeno número de animais – normalmente coelhos – que são mortos para que os seus produtos sanguíneos sejam utilizados. Anticorpos de origem animal são até usados ​​em ciências vegetais, por exemplo, para caracterizar o abundância de proteínas fotossintéticas em plantas cultivadas. Os anticorpos que se ligam seletivamente às proteínas de interesse são marcados com corantes fluorescentes ou isótopos ligam-se seletivamente para permitir a detecção e quantificação.

Nos últimos anos, os avanços na tecnologia que utiliza culturas celulares começaram a permitir produção de anticorpos recombinantes. Os anticorpos recombinantes são produzidos por cultura de células sintéticas – eliminando a necessidade de usar animais.

“Esta tecnologia existe há anos, mas não tem sido muito utilizada na investigação de plantas, quer porque os cientistas não sabem que é uma opção, quer porque tem um custo proibitivo”, disse Duncan Bloemers, antigo investigador de doutoramento no laboratório Carmo-Silva. no Universidade Lancaster e agora analista de dados da LiNaEnergy.

Um novo capítulo de livro de Bloemers e Carmo-Silva descreve como os cientistas de plantas podem aplicar este método ao seu trabalho. O capítulo, "Desenho de anticorpos para a quantificação de proteínas fotossintéticas e suas isoformasaparece em Fotossíntese: Métodos e Protocolos, um livro que compartilha métodos, protocolos e melhores práticas com a comunidade de pesquisa em fotossíntese. O capítulo inclui como a dupla projetou e desenvolveu os anticorpos específicos para as diferentes isoformas de sua proteína de interesse (Rubisco ativase), o que estava envolvido no projeto e como validar se as proteínas estão sendo devidamente reconhecidas pelos anticorpos. É importante ressaltar que os pesquisadores podem usar esses métodos detalhados para criar anticorpos para praticamente qualquer proteína e continuar a usar seus métodos de detecção atuais, como imunotransferência e Western blotting.

“A ética da nossa investigação é muito importante”, disse Carmo-Silva, professor de fisiologia vegetal e investigador principal do Obtendo Maior Eficiência Fotossintética (MADURO). “Estamos muito gratos a quem tornou possível adotar essa estratégia e utilizá-la em nosso laboratório. Esperamos que outros também o utilizem.”

Leia o capítulo:

Bloemer, D., Carmo-Silva, EA (2024). Desenho de anticorpos para a quantificação de proteínas fotossintéticas e suas isoformas. Em: Covshoff, S. (org.) Fotossíntese. Métodos em Biologia Molecular, vol. 2790. Humana, Nova York, NY. https://doi.org/10.1007/978-1-0716-3790-6_21